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科研服務(wù)

SCIENTIFIC SERVICE

基因敲除細(xì)胞系的建立

1.服務(wù)信息

流程分布	周期工作日	提交內(nèi)容
CRISPR設(shè)計(jì)	2	專業(yè)設(shè)計(jì)報(bào)告
客戶確認(rèn)	1-2	客戶回復(fù)
引物合成	2	獲得引物
質(zhì)粒構(gòu)建，引物測(cè)試及目標(biāo)基因擴(kuò)增	6	階段報(bào)告
質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞	6-8	階段報(bào)告（提供熒光照片）
活性驗(yàn)證	7-10	階段報(bào)告
獲得單克隆細(xì)胞	35	獲得30個(gè)細(xì)胞株
單細(xì)胞株突變體鑒定	10	總結(jié)報(bào)告
總周期：3-3.5月

2.基因組編輯動(dòng)物細(xì)胞系建系流程圖：

3.服務(wù)流程

案例說(shuō)明

案例展示

案例說(shuō)明

Ｘ

　　建立基因組編輯細(xì)胞系的優(yōu)選策略之多個(gè)sgRNA同時(shí)使用以高效實(shí)現(xiàn)目標(biāo)基因的靶向突變：

　　雖然有報(bào)道利用一對(duì)sgRNA，可以刪除長(zhǎng)至200 kb的基因組DNA片段，但是刪除100-200 bp相較而言更容易實(shí)現(xiàn)，更為重要的同時(shí)使用多個(gè)sgRNA，可顯著提高基因組靶向突變的成功率，如果實(shí)現(xiàn)刪除則有利于后面篩選時(shí)的基因型鑒定。

　　在哺乳動(dòng)物的基因組編輯中，一般建議同時(shí)使用(測(cè)試)3個(gè)sgRNA

　　以提高工作效率